形态学实验指导

 

本实验指导规定了本课程教学的基本范围以及大致的广度和深度,作为教师教学和学生学习的依据。在每章的“目的要求”项目中,规定了掌握熟悉了解三级内容要求。关于各章内容的要求级别教师可根据实际教学情况予以调整或增减,各章节的顺序和学时也可根据实际教学情况予以适当的调整。

 

课程内容

第一章  绪论

目的要求

1、了解形态实验学的定义和在医学教育中的地位。

2、了解形态实验学研究方法以及学习形态实验学的指导思想。

教学内容:

形态实验学的特点、要求和目的;形态实验学的发展概况和研究内容。

 

第二章  形态实验学设计概述   

目的要求

1、了解实验设计的特点。

2、掌握实验设计的基本要素和观察指标的选择。

3、熟悉实验设计原则。

教学内容:

处理因素与非处理因素;处理因素要标准化;受试对象选择的基本要求;实验效应的各项指标;实验误差及误差的控制;实验设计的原则

 

第三章  形态实验学论文的设计和撰写       

目的要求

1、实验验论文的基本特点和要求。

2、掌握实验论文撰写的方法与步骤。

3、了解实验论文的一般格式

教学内容:

实验论文的科学性、创新性、逻辑性、简洁性、规范性和可读性;收集资料、布局构思、拟定提纲、修改草稿的写作方法;实验论文的一般格式。

 

第四章  形态实验学仪器应用及技术方法

目的要求

1、熟悉切片机、脱水机的一般构造和应用。

2、了解电子显微镜、PCR仪、图象分析仪的一般工作原理。

3、熟悉细胞培养仪器应用与技术、组织化学技术。                                                            

4、熟悉切片技术。                            

教学内容:

介绍切片机、脱水机、电子显微镜、PCR仪、图象分析仪及其应用;切片技术。

组织化学技术;细胞培养技术;图象分析技术。

 

第五章 形态实验学实验动物应用以及选择原则

目的要求

1、了解实验动物的种类与选择。

2、熟悉动物实验的基本操作方法。

教学内容:

实验动物的分类方法,常用实验动物的特性及应用,实验动物的选择;实验动物的捉拿、给药途径和方法、血液采集部位和方法、实验动物的编号与标记。

 

第六章  形态实验学实验教学项目

 

循环系统

 

第一节  毛细血管形态变化及细胞反应实验         

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧。掌握组织胺影响血管变化而出现的血管现象,血管扩张,血流速度改变,轴流消失,血流摆动及白细胞附壁、游出等现象。

教学内容:

1、示教。

2、学生动手操作实验。

取材;制片;在低倍镜下选择小动脉,小静脉及毛细血管,观察血管口径,血流速度及血流情况,区别轴流(血球层)及边流(血浆层)。当在肠系膜上滴加数滴0.2%的组织胺时,继续观察数分钟。

 

消化系统

 

第二节  口腔上皮细胞化学的形态学观察实验      

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧。掌握细胞内糖的成分,但每种细胞含量各异。熟悉细胞内的糖类物质的分布。

教学内容:

1、示教。

2、学生动手操作实验。

取材;制片;显微镜下观察:反应物呈红色颗粒状,或均质、或团块状,分布于细胞质中。含糖量的多少与红色的深浅度有关,量少则淡红,量多则深红,成正比关系。一般单糖易溶于水,不能保留。所以,在标本上所观察到的主要是多糖,如糖原、糖蛋白、糖脂、粘多糖等。

  

第三节  对肝脏细胞形态影响的实验 

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧。了解正常肝脏小叶的外部形态和内部构造;掌握在外来因素的影响下出现肝细胞肿胀(发生气球样变)的形态学改变。

教学内容

1、示教。

2、学生动手操作实验。

动物分组,注射;打开腹腔,暴露肝脏;大体观察肝脏形态。制作组织切片技术;制片,镜下观察肝细胞的改变。

 

呼吸系统

                         

第四节 上皮细胞纤毛运动实验

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧。了解假复层纤毛柱状上皮形态,掌握纤毛细胞游离面纤毛的运动(向咽的方向呈有规律的麦浪式摆动),这种活跃的摆动,学生在一般固定切片上观察不到。

教学内容:

1、示教。

2、学生动手操作实验。

将活青蛙在温水中浸泡半天,然后固定在木板上,取其上颚粘膜或颊粘膜,剪成小块,置载玻片上,滴加0.65%的氯化钠水溶液,加盖玻片在镜下观察。可清楚地看到纤毛像麦浪式的有规律地摆动。

 

第五节   肺静脉受压后的肺形态学改变实验      

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧;了解当肺静脉受压阻断后,肺内毛细血管瘀血而引起肺组织一系列变化;掌握肺静脉受压后肺组织发生的形态学改变。

教学内容

1、示教。

2、学生动手操作实验。

打开胸腔,暴露双肺;观察肺体积、颜色、形态、重量以及切面变化。制片,镜下观察肺泡壁、毛细血管和小静脉以及肺泡腔内的细胞。

 

第六节  中毒性肺水肿的形态学改变实验

目的要求

本实验要求学生熟悉暴露、剥离及观察肺脏的方法;掌握中毒性肺水肿时,肺大体形态和微观结构的改变。

教学内容

1、示教。

2、学生动手操作实验。

使小鼠氯气中毒死亡。打开胸腔,暴露双肺;大体观察中毒性肺水肿后肺的颜色,质地,含气量,切面变。制片,镜下观察:肺内的毛细血管,肺间质和肺泡腔,肺泡上皮和肺泡毛细血管内皮细胞的形态改变。

 

泌尿系统

 

第七节  肾脏缺血模型的形态学观察实验  

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧 ,学会暴露左肾及左肾蒂,分离左肾动脉,将动脉夹轻轻挟住左肾动脉;缝合腹膜、肌层及皮肤。掌握肾脏缺血时的大体和微观形态学变化。

教学内容

1、示教。

2、学生动手操作实验。

打开腹腔,暴露肾脏;将动脉夹轻轻挟住左肾动脉,观察左肾动脉被挟住后,肾脏颜色,肾脏大小,切面变化。制片,镜下观察肾小管上皮细胞体积,边界,胞浆,管腔改变,间质变化。

 

第八节 肾小管形态学改变的实验 

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧。熟悉肾脏正常的形态结构,掌握肾脏在无机汞化合物的作用下所发生的形态学改变。

教学内容

1、示教。

2、学生动手操作实验。

动物分组,静脉注射。打开腹腔,暴露肾脏;大体观察双侧肾脏外形和切面变化。制片,镜下观察肾小管尤其近曲小管上皮细胞,体积,胞浆,细胞核和间质变化。

  

骨和皮肤系统

 

第九节   纤维性骨痂的形成观察实验

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧。掌握外伤骨折后纤维性骨痂生成的形态学变化及外伤后骨折的愈合过程。

教学内容

1、示教。

2、学生动手操作实验。

静脉麻醉。碘酒消毒手术区,铺盖无菌洞巾,纵行切开皮肤,钝性分开肌肉暴露出桡骨中上1/3骨干,切开骨膜,注意保护两侧软组织。用电锯将桡骨干中上1/3处锯开成完全断离状。大体观察骨折处形态,颜色。术后分笼喂养随机编号。分别于术后第3456天取材镜下观察成纤维细胞毛细血管,机化和纤维化状态。

 

第十节   皮肤创伤愈合的形态学观察实验    

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧。掌握皮肤创伤修复时肉芽组织增生的形态学变化。

教学内容

1、示教

2、学生动手操作实验。

静脉麻醉。消毒小鼠左后肢股外侧皮肤,铺盖无菌洞巾,然后作一外科手术切口长1cm深达皮下压迫止血、外翻缝合、包扎伤口。手术后颗粒饲料喂养,观察动物的生活状态并做记录。观察皮肤创伤后切口表面。制片,镜下观察新生肉芽组织和创口表面覆盖的表皮。

  

生殖系统

 

第十一节  睾丸活动精子抑制实验

目的要求 

熟悉实验方法及操作技巧。了解活动精子的头、尾形态和运动状态;掌握运动状态的精子被药物抑制,停止运动发生的时间和形态。

教学内容

1、示教

2、学生动手操作实验。

小鼠睾丸制取活精子;涂片;镜下观察活动精子和药物抑制精子运动。

  

神经系统

 

第十二节  大脑皮层神经元形态学改变的观察实验

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧。掌握大脑的结构及一氧化碳吸入所致大脑皮层的形态学变化。

教学内容

1、示教

2、学生动手操作实验。

实验动物分组,一氧化碳吸入。剪刀打开颅骨,大体观察脑体积增大脑沟变浅脑回增宽,切面见点状出血。小灶状坏死。制片,镜下观察两组动物神经元的形态、胶质细胞、脑血管和外周组织的改变。

 

第十三节   对多极神经元形态学改变的实验

目的要求

熟悉实验方法及操作技巧。掌握大脑、小脑的一般结构及观察大脑及小脑的形态结构特点,了解有机磷引起的多极神经元的形态学改变。

教学内容

1、示教

2、学生动手操作实验。

实验动物分组,腹腔注射有机磷农药。注射后,观察动物的生活状态并做记录。剪刀打开颅骨,大体观察软脑膜情况;小脑的脑沟,脑回形态。制片,镜下观察小脑内多极神经元(主要是锥体细胞、星形细胞、蒲肯野细胞)变化和胶质细胞的数量。。

 

    第十四节  脊神经节和胶质细胞的形态学实验

目的要求 

熟悉实验方法及操作技巧。熟悉正己烷对脊神经节细胞和神经胶质细胞的影响。

教学内容

1、示教

2、学生动手操作实验。

静脉或乙醚麻醉。手术方法取出脊神经节做组织培养,倒置显微镜观察实验组标本与对照组标本,连续观察3天。

 

              第十五节  影响中脑神经细胞形态学改变的观察实验

目的要求 

熟悉实验方法及操作技巧。熟悉四氯化碳致影响胚鼠中脑神经细胞发育的形态学改变,了解四氯化碳对机体的影响。

教学内容

1、示教

2、学生动手操作实验。

随机分组。A组孕鼠腹腔注射四氯化碳2ml。麻醉孕鼠,打开腹腔,辨认子宫,剖开取胚鼠。取中脑做冰冻切片,HE染色,显微镜观察。B组胚鼠中脑做细胞培养,培养基中按1~4μmol/L加四氯化碳。倒置显微镜观察连续3天。 

 

细胞

第十六节  细胞膜相结构形态学改变的实验

目的要求 

熟悉实验方法及操作技巧。熟悉在缺氧的情况下肾小管上皮细胞膜相结构的形态学改变。

教学内容

1、示教

2、学生动手操作实验。

静脉麻醉,打开腹腔,分离出左侧肾动脉,予以结扎后,大体观察肾脏体积,颜色;光镜下观察肾小管上皮细胞,胞浆和胞核;电镜下观察细胞表面微绒毛,线粒体、内质网和溶酶体。

 

胚胎学

 

第十七节   早期胚胎培养观察实验   

目的要求 

熟悉实验方法及操作技巧。熟悉胚前期和胚期变化;掌握胚胎早期发育结构的形成和演变。

教学内容

1、示教

2、学生动手操作实验。

将受精鸡蛋注明日期和时间,置入温箱,其温度应保持在37℃~38℃之间。取预期孵化时间取材,固定,脱水,包埋,附贴连续切片;按操作步骤制作鸡胚裱片。显微镜下观察16小时鸡胚裱片(胚层的形成)、二天鸡胚横切片(三胚层的分化)。

  

第十八节  胎盘形态观察实验

目的要求 

熟悉胎盘的大体形态,掌握胎盘绒毛、绒毛间隙以及滋养层细胞的微观形态结构,作为基础鉴别滋养细胞病变。

教学内容

1、示教

2、学生动手操作实验。

观察胎盘大体形态,辨别胎盘的母体部分和子体部分以及胎盘与脐带连接的部位,分辨脐动、静脉。然后取材、固定胎盘组织,分小组制作切片。

 

第七章   创造性实验设计方案

目的要求 

熟悉实验设计方法、实验设计原则。在已达到的知识水平(细胞生物学、遗传学、解剖学、组织胚胎学、生理学、病理学、病原生物学、免疫学等)的基础上,自己确立研究题目,设计一项课题。

教学内容

阅读有关资料,制定实验技术路线、确定研究方法和研究手段,做开题报告,制定观察指标。组织实验小组实施,撰写论文,实验小组召开答辩会。

 

 

(山东大学医学院形态学教学实验室)

 


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