组织化学技术（ histochemistry ）与细胞化学技术（ cytochemistry ）是利用组织或细胞内构成成分的化学性质或物理性质，通过化学反应或物理反应的原理来显示这些成分的组织学研究方法。通过这些方法可以对组织或细胞内的成分进行定位、定性和定量的研究。如：组织和细胞中的糖类、脂类、酶、核酸和蛋白质等成分与化学试剂发生化学反应或物理反应，形成有色的终末产物，可以在显微镜下进行观察分析。
组织化学技术与细胞化学技术又可以分为一般组织化学技术、酶组织化学技术、免疫组织化学技术和电镜细胞化学技术。
一 . 糖类显示法
显示多糖和蛋白多糖常用的方法是过碘酸－雪夫反应（ periodic acid Schiff reaction ， PAS 反应）
1 . 试剂： 1% 过碘酸水溶液； Schiff 氏液；亚硫酸溶液；苏木精或甲绿复染液。
2 . 材料：肝脏组织冰冻切片。
3 . 实验步骤：
1 ）肝脏切片入 95% 酒精 10 分钟。
2 ）蒸馏水稍洗。
3 ） 1% 过碘酸水溶液浸洗 10~15 分钟。
4 ）蒸馏水洗数次。
5 ）入 Schiff 氏液作用 30 分钟。
6 ）亚硫酸溶液洗 2~3 次，每次约 1 分钟。
7 ）自来水充分冲洗（约 5 分钟），蒸馏水稍洗。
8 ）苏木精复染 1~3 分钟或甲绿复染液复染 15 分钟。
9 ）自来水冲洗、晾干。
10 ）中性树胶封片
对照：可先用唾液淀粉酶滴于切片上，置 37 ℃ 作用 30 分钟 ~1 小时，再按实验步骤进行。
4 . 结果： PAS 反应阳性部位可见红色颗粒。对照片应为 PAS 反应阴性，证明阳性反应物为糖原。
5 . 原理：含乙二醇基的糖类，经过碘酸氧化产生双醛基，双醛基与 Schiff 氏液反应，使无色品红变为紫红色沉淀物显现于含多糖部位。
附： Schiff氏液配制方法：1g碱性品红溶于200ml沸水，当冷却至60 ℃时，过滤。过滤后加 1N HCl 20ml，亚硫酸氢钠2g，塞紧瓶口过夜。次日再加入1g活性炭，摇匀，过滤，滤液应为无色透明，塞紧瓶口，置暗、冷处备用。染液变红则失效。
亚硫酸溶液配制方法： 10%亚硫酸氢钠（或偏重亚硫酸钠）5ml，1N HCl 5ml，蒸馏水90ml。
二 .核酸显示法
1 . 甲绿－派洛宁法 甲绿－派洛宁（ Methylgreen － Pyronin ）染色法是显示核酸常用的方法。
1 ）试剂： Carnoy 固定液；甲绿－派洛宁染液
2 ）材料：新鲜小鼠骨髓涂片或血涂片
3 ）实验步骤：
• 骨髓涂片或血涂片在 Carnoy 固定液中固定 10~15 分钟。
• 80% 酒精浸洗 2~3 分钟。
• 蒸馏水洗数次。
• 入甲绿－派洛宁染液 30 分钟。
• 蒸馏水速洗，除去片上浮色，空气中晾干。
• 中性树胶封片或直接油镜观察。
对照：涂片固定后，先用核糖核酸（ RNA ）酶 37 ℃消化 1小时再进行实验步骤，此对照片上只显示脱氧核糖核酸（ DNA ）。
4 ）结果： RNA 呈红色，见于核仁和胞质中； DNA 呈蓝绿色，见于细胞核的染色质。
5 ）原理：甲绿和派洛宁均为碱性染料，它们可以分别与细胞内的 DNA 和 RNA 结合而呈现不同的颜色。甲绿易与聚合程度较高的 DNA 结合而使之呈绿色，派洛宁能与聚合程度较低的 RNA 结合使之呈红色。
附：甲绿－派洛宁染液的配制方法： 2% 甲绿液配制：原装甲绿一般都混有甲基紫，故配制甲绿－派洛宁染液前，必须先将甲基紫除去。方法是：取原装甲绿 3~5g ，溶于 100ml 蒸馏水中，入分液漏斗中，然后加适量的氯仿（甲绿液 ∶ 氯仿 =1 ∶ 1.5 ），充分摇匀 , 然后静置，待氯仿呈紫色时，弃去氯仿部分，保留水溶液部分，如此抽提甲基紫数次，直至氯仿无紫色为止。将甲绿液保存于冰箱备用。 5% 派洛宁液配制： 5g 派洛宁加入 100ml 蒸馏水中，置 40 ℃温箱中加温溶解，可以搅拌，待完全溶解后过滤备用。 甲绿－派洛宁染液配制： 2% 甲绿水溶液 6ml ， 5% 派洛宁水溶液 2ml ， 0.1mol 的醋酸盐缓冲液 16ml ，蒸馏水 16ml ，使用前临时混合。存于冰箱，可用数次。
2 . Feulgen 反应 Feulgen 反应是用来显示 DNA 的一种染色法。
1 ）试剂： Carnoy 固定液； Schiff 氏液（配制同前）；亚硫酸溶液； 1N HCl ； 0.5~1% 亮绿。
2 ）材料：新鲜小鼠骨髓涂片
3 ）实验步骤：
• 骨髓涂片在 Carnoy 固定液中固定 10~15 分钟。
• 80% 酒精浸洗 2~3 分钟。
• 蒸馏水洗数次。
• 1N HCl （室温）浸洗 3 分钟。
• 1N HCl （ 60 ℃ ）水解 8~10 分钟。
• 稍冷却入 1N HCl （室温）浸洗 2 分钟。
• 蒸馏水洗数次。
• 入 Schiff 氏液作用 30 分钟 ~1 小时， 37 ℃温箱中，应密盖染色缸，否则易失败。
（ 9 ）亚硫酸溶液洗 3 次，每次约 1.5 分钟。
（ 10 ）自来水洗 5~10 分钟。
（ 11 ） 0.5% 亮绿复染 1~3 分钟
（ 12 ）水洗、晾干、封片或不封片直接油镜观察。
对照：不经 HCl 水解，其它步骤相同，则呈阴性反应。或先用 DNA 酶水解，再按实验步骤进行，也呈阴性反应。
4 ）结果： DNA 呈紫红色，胞质呈绿色。
5 ）原理： DNA 经 HCl 水解产生醛基，醛基与 Schiff 氏试剂结合形成一种紫红色沉淀物，因此染色后，胞核中有紫红色产物处，即 DNA 所在之处。
三 . 脂类物质显示法
脂类物质包括脂肪和类脂，染色方法很多，在此，仅介绍两种方法 。
1 . 油红 O 中性脂肪染色法 油红 O （ oil red ）染色法是显示脂类物质常用的方法。
1 ）试剂：油红 O 染液； Harri 氏或 Ehrlich 氏苏木精。
2 ）材料：肾上腺冰冻切片。
3 ）实验步骤：
• 冰冻切片用蛋白甘油贴于载玻片上。
• 切片经 60% 异丙醇淋洗 30 秒 ~1 分钟。
• 浸入油红 O 稀释染液 5~10 分钟。
• 60% 异丙醇分色至背景无色。
• 蒸馏水速洗。
• Harri 氏或 Ehrlich 氏苏木精复染 3~5 分钟。
• 1%Na 2 HPO 4 1~2 分钟使胞核变蓝。
• 蒸馏水洗。
• 甘油明胶封片。
4 ）结果：脂滴橘红色，磷脂粉红色，胞核蓝色。
附：油红 O 染液配制方法：原液：油红 O 0.6g ，异丙醇（ 99% ） 100ml 。稀释液：油红 O 原液 20ml ，蒸馏水 20ml ，过滤后使用。
2 、类脂苏丹黑 B 染色法 苏丹染料也是脂类物质染色常用的试剂，苏丹黑 B （ Sudan black B ）染色效果最佳，尤以染磷脂较好。对粒细胞颗粒和细胞内微细结构染色好。
1 ）试剂：苏丹黑 B 染色液； Wright 氏染液或 1% 番红花红水液。
2 ）材料：大鼠肾上腺冰冻切片。
3 ）实验步骤：
• 切片以 10% 甲醛固定 10~30 分钟。
• 蒸馏水洗 1~2 分钟。
• 入苏丹黑 B 染色液中染色 30 分钟 ~1 小时。
• 蒸馏水略洗，晾干。
• 入 Wright 氏染液 5~8 分钟或 1% 番红花红水液 5~10 分钟。
• 蒸馏水速洗，滤纸吸干。
• 70% 酒精分色 1~3 分钟。
• 95% 酒精和无水酒精分色与脱水各 30 秒 ~1 分钟。
• 晾干后甘油明胶封片。
4 ）结果：类脂呈黑色或蓝黑色，胞核紫蓝色（ Wright 氏染色）或红色（ 1% 番红花红染色）。
5 ）原理：苏丹黑 B 为脂溶性染料，染色后与组织中的脂类物质结合，故组织中含脂类物质处呈黑色。
附：苏丹黑 B染色液配制方法：苏丹黑B保存液：苏丹黑B 0.15g溶于50ml无水酒精，摇匀，放置2天，时常摇动，使苏丹黑B完全溶解。碳酸磷酸缓冲液：石碳酸结晶8g，无水酒精15ml，混合溶解；磷酸氢二钠（Na 2 HPO 4 12H 2 O）0.15g，蒸馏水50ml，混合溶解；此二液混合即成缓冲液。苏丹黑B染色液：苏丹黑B保存液40ml，碳酸磷酸缓冲液20ml，混合过滤即可使用 。
四、酶组织化学方法
酶是一大类特殊的蛋白质，在生物化学反应中起催化剂的作用。利用这种特性，使酶促反应的终产物形成有色沉淀物，从而检测酶在组织中的定位、活性和定量变化的组织化学方法即酶组织化学方法。
1 、显示碱性磷酸酶的钙钴法 在人体内碱性磷酸酶（ Alkaline phosphatase, AlP ）主要分布在中性粒细胞、近曲小管和部分血管内皮细胞。
1 ）孵育液：
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